细胞株严格的消毒灭菌对保证细胞培养的成功是极为重要的，其方法分为物理法和化学法两类。前者包括干热、湿热、滤过、紫外线及射线等，后者主要指使用化学消毒剂等。

　　①热灭菌：玻璃器皿，160~170℃，90~120min或180℃45~60min。

　?、谡羝鹁河糜诓Ａ髅蟆⒙似飨鸾喝⒔馄视镁?、耐热塑料器具、受热不变性的溶液等，不同物品其有效灭菌压力和时间不同，如培养用液、橡胶制品、塑料器皿等用68kPa(115℃)高压灭菌10min;布类、玻璃制品、金属器械等用103kPa(121.3℃)高压灭菌15~20min。

　?、勐斯菏视诤胁荒腿瘸煞值呐嘌褪约恋某?，用孔径为0.22μm微孔滤膜可除去细菌和霉菌等，用此滤膜过滤两次，细胞株可使支原体达到某种程度的去除，但不能除去病毒。

　　④紫外线：紫外线的波长为200~300nm，zui强是在254 nm，6~15平方米zui少一只紫外灯，高度要在2.5m以下，湿度45%~60%，杆菌效果好，球菌次之，霉菌、酵母菌zui差，实验前应不低于30分钟的照射时间。

　?、菅粝荆旱庇鲇邢赴嘌鱿侄啻挝廴?，或实验室两个月一次的常规消毒，均可用高锰酸钾5~7.5g，加甲醛(40%)10~15ml，混合放入一开放容器内，立即可见白色甲醛烟雾，消毒房间需封闭24小时，致少4小时以上。

　?、拗蠓邢荆航裘芮榭鍪笔褂?，金属器械和胶蹇在水中煮20~30分钟，趁热倾去水分即可使用。

　?、呋荆夯б┢废久鹁ㄊ怯τ媚苌彼牢⑸锏幕е平邢久鹁姆椒?。实验室桌面、用具及洗手用的溶液均常用化学药品进行消毒杀菌。细胞株常用的有：2%煤酚皂溶液(来苏尔)、0.25%新洁尔灭、3~5%甲醛溶液、75%酒精。